梯度淋洗时必须重视这个操作！

视频简介

本视频讲解离子色谱梯度淋洗中的一个关键步骤：每次梯度淋洗结束时，流动相的组成已经与分析开始时大不相同（例如初始为5 mM KOH，结束时可能升至40 mM KOH）。为了进行下一次梯度淋洗，必须用初始浓度的流动相对色谱柱彻底平衡，使柱内环境恢复到起始状态。如果平衡时间不足，下一次进样时峰的保留时间会发生改变，导致重复性差、保留时间漂移，甚至峰识别错误。

因此，在设置梯度程序时，必须在梯度程序的最后加入一段后运行时间（post-run / re-equilibration time）。建议后运行时间与梯度洗脱时间相当，或至少为5–10倍柱体积（例如1 mL/min流速下，4.6×250 mm柱约需5–10分钟）。具体时间可根据色谱柱说明书和实际保留时间稳定性验证确定。

本视频将演示如何在工作站中设置后运行时间，以及平衡不足导致的保留时间漂移现象，帮助实验人员保证梯度方法的重复性。